每期节目一共有六位明星玩家，在设置的游戏剧情中分别扮演【侦探】和【嫌疑人】两种角色。【侦探】游离于剧情故事之外进行案件分析与侦查，而五位【嫌疑人】当中隐藏着一名真正的【凶手】，只有【凶手】可以说谎，6位玩家需在现场的场景内，寻找线索指认真凶，只有找到真正的凶手，玩家才获胜。每期都有神秘高能玩家前来挑战。游戏设置侦探酬金，【凶手】检举成功时计算为玩家获胜，【侦探】获得两根金条，其余非凶手玩家分别获得一根金条；【凶手】成功隐藏身份时，则拿走全部金条。第二季起，每期抽取角色卡时，每位玩家将获得一根金条，如果【真凶】逃脱则真凶获胜，其余玩家将所有金条交给真凶；如果抓住真凶，则投票正确的玩家保留金条，【侦探】若两次都投对则可额外获得一根金条，其余玩家需归还金条。
不在场证明阐述
五名嫌疑人分别阐述自己的不在场证明。
第一轮：
现场搜证：不在场证明阐述之后，六名玩家分为两组轮流取证，每组限时十分钟，每人可拍摄十张照片。
集中推理：六名玩家根据第一轮现场搜证搜集到的证据完成推理，完成后侦探需要当众投出第一票（第二季起非公开投出第一票）。
第二轮：
现场搜证：第一轮集中推理之后，六名玩家集体进入现场取证，中途侦探可以单独提审嫌疑人。
集中推理：两轮搜证后，六名玩家集中总结推理思路。
第三轮：
（第二季起）现场搜证：每位玩家有3分钟单独搜证，不可以分享线索。
（第四季起）现场搜证：通过“神秘小黑屋”测试环节（该内容在会员周边节目《名侦探俱乐部》播放）的玩家有3分钟单独搜证，不可以分享线索。
单独投票
六名玩家进行非公开单独投票，得票最多的玩家则被指控进笼。